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              TRITC標記賴氨酸葡聚糖

              來源:作者:人氣:-發表時間:2020-07-14 14:56:00【
              TdB葡聚糖衍生物
              TRITC標記賴氨酸葡聚糖
              TRITC標記賴氨酸葡聚糖是一種葡聚糖衍生物,攜帶游離伯胺和游離羧酸鹽以及熒光染料四甲基羅丹明(TRITC)。賴氨酸是一種天然氨基酸,在生物化學和生命科學中廣泛用于結合和固定。TRITC標記賴氨酸葡聚糖也稱為FLUORO-RUBY®或FLUORORUBY®。純化后,檢查所有批次的分子量、取代度、干燥失重和游離TRITC。TRITC-標記賴氨酸葡聚糖為粉色粉末。TdB提供分子量從4 kDa到500 kDa的TRITC標記賴氨酸葡聚糖。
              高質量的TRITC標記賴氨酸葡聚糖具備:
              • 優異的分子量分布 (低多分散性)
              • 明亮的熒光
              • 細胞和組織的固定性
              • 容易與染料或生物分子結合
              • 可完全溶于水,在溶液中或在保質期內具有良好的穩定性
              結構與性質
              TRITC賴氨酸葡聚糖是從腸系膜明串珠菌中提取的具有良好特性的葡聚糖合成的。葡聚糖部分首先用賴氨酸標記,然后在溫和條件下暴露于TRITC中形成TRITC標記賴氨酸葡聚糖。純化后,對產物的分子量、外觀、溶解度、取代度、pH、游離賴氨酸和游離TRITC進行檢測控制。賴氨酸的取代度在0.005-0.03(mol賴氨酸/mol葡萄糖)之間,TRITC的取代度為0.001-0.01(mol TRITC/mol葡萄糖)。產品分子量由相應近似分子量的葡聚糖標定。
              舉例,TRITC標記賴氨酸葡聚糖4的分子量約為4000 Da。實際分子量由GPC確定。COA上會注明該指標。葡聚糖來自于明串珠菌B-512F,本質上是一個線性的α-(1-6)-連接的葡萄糖鏈,且沿鏈分布的α-(1-3)支鏈的百分比很低(2-5%)。葡聚糖片段的分子量在4000到500000之間,并通過GPC、旋光度、吸光度和其他控制參數進行仔細控制。
              TRITC標記賴氨酸葡聚糖結構示意圖
              圖1 TRITC標記賴氨酸葡聚糖結構示意圖。賴氨酸是否主要通過 ε- 或α-氨基基團與葡聚糖結合尚未見諸研究。
              物理性質
              TRITC標記賴氨酸葡聚糖是粉色至紫色粉末,可完全溶于水和電解質。TRITC標記賴氨酸葡聚糖不溶于大多數有機溶劑,例如乙醇,甲醇,丙酮,氯仿,乙酸乙酯等。 賴氨酸的取代度介于 0.005-0.03之間 (mol 賴氨酸/mol 葡萄糖),TRITC的取代度則介于0.001-0.01之間 (mol TRITC/mol 葡萄糖)。TRITC 的最大激發波長為550 nm,最大發射波長為574 nm。 (圖2)。
              TRITC標記賴氨酸葡聚糖在pH為9.0的0.025M的硼酸鹽緩沖液中的熒光吸收圖譜
              圖2. TRITC標記賴氨酸葡聚糖在pH為9.0的0.025M的硼酸鹽緩沖液中(12mg溶于50毫升緩沖液)的熒光吸收圖譜,
              激發波長552nm,發射波長576nm。
              儲存和穩定性
              有關TRITC標記賴氨酸葡聚糖穩定性的前瞻性研究尚未進行。但是根據葡聚糖和賴氨酸與葡聚糖鏈的脲鍵的結構特性判斷,該產品具有較高的穩定性。TRITC與賴氨酸之間的硫脲鍵也是穩定的。
              建議將產品儲存在氣密容器中。TRITC賴氨酸葡聚糖可在室溫下儲存。室溫下儲存在干燥密閉的容器中,TRITC標記賴氨酸葡聚糖可穩定保存6年。
              應用
              帶氨基的葡聚糖,作為生命系統結合和固定的多功能工具,對科學界極具價值1,2 。用于接合時,賴氨酸的游離氨基能共價結合到諸如NHS酯或異硫氰酸酯之類的活化體上,或使用諸如DCC、HOBt或HATU等常見肽偶聯劑與羧酸偶聯。進行細胞和組織固定是為了將組分保存在“類生命狀態”,并使細胞具有可滲透性,允許抗體進入細胞結構,例如用于顯微鏡研究或免疫染色。賴氨酸葡聚糖上的氨基與固定劑(此處是甲醛或戊二醛)反應,與蛋白質和脂類等生物分子形成共價交聯,固定整個系統和葡聚糖。這在分子成像中定性或定量評估生物事件時尤為重要。如果沒有固定,活系統中的這些結構會迅速地解體和擴散。四甲基羅丹明/TRITC是一種熒光染料,其最大激發波長為550nm,最大發射波長為574nm。
              產品列表
              產品編號
              品名
              分子量(kDa)
              包裝
              TRITC-lysine-dextran 4
              4
              10 mg
              50 mg
              TRITC-lysine-dextran 10
              10
              10 mg
              50 mg
              TRITC-lysine-dextran 70
              70
              10 mg
              50 mg
              TRITC-lysine-dextran 500
              500
              10 mg
              50 mg
              參考文獻
              1. (a) Henley JR, Krueger EW, Oswald BJ, McNiven MA, J Cell Biol (1998) 141:85-99; (b) Fritzsch B, Christensen MA, Nichols DH; J Neurobiol. 1993 Nov;24(11):1481-99; (c) Fritzsch B., J Neurosci Methods (1993) 50:95-103.
              2. Schmued, L., Kyriakidis, K., Heimer, L., Brain Res., 526, (1990) 127-134.
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